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番紅O染色液，特殊染色，簡稱特染，是在HE染色的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的染色技術(shù)，是臨床病理診斷中重要的輔助技術(shù)之一，許多在常規(guī)HE染色難以診斷的疾病，通過特殊染色和組織化學(xué)染色可以進(jìn)一步確診，有助于提高臨床病理診斷水平。 在觀察組織細(xì)胞形態(tài)改變時，特殊染色既能觀察到其組織成分的變異，又能對HE染色中看到的組織或細(xì)胞內(nèi)某些相似物質(zhì)或結(jié)構(gòu)（如膠原纖維、色素或空泡等）進(jìn)行鑒別以及區(qū)別病灶中的病原體等問題。經(jīng)過先輩不懈努力，先后創(chuàng)建了含鐵血黃素染色、結(jié)核菌抗酸染色、膠原纖維和肌纖維的Van Gieson染色及脂肪染色等。 組織化學(xué)染色是把組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和生物化學(xué)結(jié)合在一起的一門染色技術(shù)，應(yīng)用某些試劑或化學(xué)染料與組織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行特異性反應(yīng)或染料分子結(jié)構(gòu)的某些基團(tuán)與組織內(nèi)的相應(yīng)基團(tuán)特異性結(jié)合而顯色，既能確定組織細(xì)胞的某些特殊成分，又能顯示出這些特殊成分在組織細(xì)胞中的分布和含量以及在病變時所發(fā)生的變化。例如顯示肝糖原的高碘酸-無色品紅（糖原PAS）染色法，組織切片先經(jīng)高碘酸氧化，使組織中含有己糖結(jié)構(gòu)的碳鍵打開，生成二醛，后者與無色品紅/雪夫結(jié)合呈陽性反應(yīng)，形成紫紅色顆粒狀復(fù)合物，可以用消化法做對照可以確定是否真的為糖原物質(zhì)。因此，PAS染色可以確定肝細(xì)胞內(nèi)糖原的存在，通過觀察糖原的分布和含量以及變化，可了解肝細(xì)胞的功能狀態(tài)。因此，蛋白質(zhì)、糖類、核酸、色素、某些金屬鹽和脂肪等特殊染色以及各種酶類的顯色反應(yīng)都屬于組織化學(xué)染色技術(shù)。 幾乎所有組織都可以用冰凍切片進(jìn)行染色，多數(shù)組織可以通過石蠟切片進(jìn)行染色，但是脂肪和酶類通過冰凍切片染色，因為脂肪組織溶于乙醇二等有機溶劑，而石蠟切片的前提就是需要用乙醇和二處理；酶的染色是因為酶的活性一般在37℃有活性， 但是石蠟包埋的溫度都在60℃左右。 特染染色的簡易步驟參考如下：組織固定-包埋切片-切片用脫蠟至水-蘇木素染色-鹽酸乙醇分化-藍(lán)化液返藍(lán)-伊紅染色-梯度乙醇脫水-透明液透明-中性樹膠封片。骨組織除了常規(guī)的操作步驟還需要進(jìn)行脫鈣處理才能進(jìn)行包埋切片等后續(xù)步驟。 注意事項： 1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈；系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。 2、鹽酸乙醇分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠，以便清洗酸。 3、冷凍切片染色時間盡量要短。

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